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高效液相色谱仪流动相类型与性质

2019-10-28

   高效液相色谱仪流动相类型与性质

  高效液相色谱仪流动相类型有多种,流动相性质对样品的分离影响很大。
  一、流动相类型:
  1、按组成可分:单组分流动相和多组分流动相。
  2、按极性可分:极性流动相、弱极性流动相和非极性流动相。
  3、按作用可分:底剂和洗脱剂。
  4、按使用方式可分:等度流动相和梯度流动相。
  5、按用途可分:己烷、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈和水等。
  采用二元或多元组合溶剂作为流动相,可以灵活调节流动相的极性和增加选择性,改进分离和调整出峰时间。
  二、流动相性质:
  1、底剂决定基本的色谱分离,洗脱剂对某几个组分选择分离。流动相组成改变,极性改变,可显著改变组分分离状况。
  2、亲水性固定液常采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定相的极性,称为正相液液色谱,极性柱称正相柱,正相柱的底剂用低极性溶剂,洗脱剂用极性较强的溶剂。
  3、若流动相的极性大于固定液的极性,称为反相液液色谱。非极性柱称为反相柱,反相柱常以水为流动相的主体,再加入不同配比的有机溶剂做调节剂。
  高效液相色谱流动相是液体,对组分有亲合力,并参与固定相对组分的竞争,正确选择流动相溶剂直接影响样品组分的分离。
  一、溶剂对于待测样品必须具有合适的极性和良好的选择性。
  二、溶剂与检测器匹配:
  对于紫外吸收检测器,不能用对紫外光有吸收的溶剂。
  对于示差折光检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达到最高灵敏度。
  三、高纯度:
  由于高效液相色谱灵敏度高,对流动相溶剂的纯度要求高。不纯的溶剂会引起基线不稳或产生假峰。
  四、化学稳定性好。
  五、粘度适中:
  若溶剂粘度高,会增高压力,不利于分离。常用的低粘度溶剂有丙酮、甲醇和乙腈等。
  粘度过低的溶剂不宜采用,如戊烷等,它们容易在色谱柱和检测器内形成气泡,影响分离。

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